本书是“色谱技术丛书”中专门介绍高效液相色谱的分册。书中从操作者的角度对高效液相色谱的分类发展与高效液相色谱仪器做了全面介绍，在此基础上对液固色谱法和液液色谱法、正相和反相键合相色谱法、亲水作用键合相色谱法、疏水作用键合相色谱法、微柱液相色谱法、二维高效液相色谱法等多种高效液相色谱方法的色谱分离条件、分析操作、实验技术和注意事项等进行了详细的阐述，并对梯度洗脱的原理和方法以及高效液相色谱法的基本理论做了系统介绍，总结了高效液相色谱新技术的进展。本次修订根据高效液相色谱近年的发展对第二版内容做了大幅更新，新增了亲水作用键合相色谱法、疏水作用键合相色谱法以及高效液相色谱新技术的进展三章，删除了第二版中体积排阻色谱法和高效液相色谱分离条件的优化两章。对其他各章增补了仪器、填料、理论和应用方面的很新进展和技术资料。本书适用于各领域中从事液相色谱分析工作的技术人员学习参考，也可作为高等院校分析化学及相关专业师生的教学参考书。 于世林，北京化工大学教授，1960年毕业干北京大学化学系，曾任北京化工大学应用化学系系主任，现为分析化学教授，北京理化分析测试学会色谱分会理事。多年从事分析化学、色谱分析的教学和科研工作，承担多项有关高效液相亲和色谱固定相合成及应用的国家自然科学基金项目和北京市自然科学基金项目。主持编写《亲和色谱方法及应用》《高效液相色谱方法及应用》《波谱分析法》《分析化学》等著作和教材8册，参与《分析仪器手册》《化验员读本》等4册著作部分章节的编写工作。 章  绪论节  高效液相色谱方法简介 2一、液相色谱技术的初现—茨维特的经典实验 2二、高效液相色谱方法的显现 3三、高效液相色谱方法的发展现状 6第二节  高效液相色谱方法的特点 13一、与经典液相（柱）色谱法比较 13二、与气相色谱法比较 14三、高效液相色谱法的特点 15第三节  高效液相色谱方法的分类 15一、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类 15二、按溶质在色谱柱洗脱的动力学过程分类 17第四节  高效液相色谱法的应用范围和局限性 19一、应用范围 19二、方法的局限性 19参考文献 20第二章  高效液相色谱仪简介节  流动相及储液罐 23一、储液罐 23二、流动相脱气 24第二节  高压输液泵及梯度洗脱装置 26一、高压输液泵 26二、输液系统的辅助设备 39三、梯度洗脱装置 41第三节  进样装置 44一、停流进样装置 44二、六通阀进样装置 45三、自动进样器 47第四节  色谱柱 48一、柱材料及规格 48二、柱填料和柱寿命 49三、保护柱 50四、柱连接方式 51五、柱温控制 51第五节  检测器 52一、检测器的分类和响应特性 52二、紫外吸收检测器 54三、折光指数检测器 60四、电导检测器 62五、荧光检测器 63六、蒸发光散射检测器 64七、带电荷气溶胶检测器 68八、多角度光散射检测器 70九、质谱检测器 72第六节  色谱数据处理装置 81一、手持控制器 81二、化学工作站 81第七节  高效液相色谱仪器的发展趋势 82一、从1969年到1992年 82二、从1992年到2002年 83三、从2002年到2012年 83四、2012年到现在 84参考文献 88第三章  液固色谱法和液液色谱法节  分离原理 90一、吸附系数 90二、分配系数 91第二节  固定相 92一、液固色谱固定相 92二、液液色谱固定相 106第三节  流动相 107一、表征溶剂特性的重要参数 109二、液固和液液色谱的流动相 116第四节  二元溶剂体系中液固和液液色谱的保留规律 117一、溶质保留值的基本方程式 117二、液固色谱的保留值方程式 118三、液液色谱的保留值方程式 118参考文献 119第四章  正相和反相键合相色谱法节  分离原理 120一、正相键合相色谱法的分离原理 121二、反相键合相色谱法的分离原理 121第二节  固定相 123一、键合固定相的制备及分类 123二、键合固定相的性质 129三、使用键合固定相应注意的问题 131第三节  流动相 133一、溶剂的选择性分组 133二、在键合相色谱分析中选择流动相的一般原则 134三、改善色谱分离选择性的方法 138四、多元混合溶剂的多重选择性 140五、由溶剂选择性三角形描述混合溶剂组成的特性 143六、溶质保留值随溶剂极性变化的一般保留规律 143七、用线性溶剂化自由能关系（LSER）来表征反相液相色谱中溶质的保留值方程式 144第四节  新型高效化学键合固定相 146一、新型单齿键合固定相 146二、新型双齿键合固定相 148三、杂化有机/无机粒子材料 149四、氟化烷基和苯基固定相 152五、反相/离子交换混合模式固定相 154第五节  化学键合固定相分类方法简介 157一、Tanaka分类方法 158二、Tanaka分类表征方法 160三、扩展Tanaka分类方法 161第六节  离子对色谱法 166一、分离原理 166二、固定相、流动相和对（反）离子 167三、影响离子对色谱分离选择性的因素 168参考文献 171第五章  亲水作用键合相色谱法节  亲水作用液相色谱的分离机理 176一、分子极性 176二、分离机理 176第二节  固定相 178一、固定相的分类 178二、固定相保留特性及选择性的评价标准 188第三节  流动相 197一、流动相的组成 197二、流动相对保留值和选择性的影响 197三、流动相各种影响因素的图示方法 205第四节  静电排斥亲水作用液相色谱 207参考文献 209第六章  疏水作用键合相色谱法节  疏水作用液相色谱的分离原理 211一、蛋白质结构特点 212二、疏水作用机理 212三、两亲作用色谱 213第二节  固定相 214一、固定相载体 214二、疏水配位体 215第三节  流动相 215一、流动相的组成 215二、影响HIC分离选择性的因素 216第四节  疏水作用色谱的应用 217一、疏水作用色谱的操作过程 217二、蛋白质混合物的分离 218参考文献 219第七章  梯度洗脱节  基本原理 221一、等度洗脱 221二、梯度洗脱 222第二节  影响梯度洗脱的各种因素 224一、梯度洗脱时间（tG）对分离的影响 224二、梯度陡度（T）对保留值的影响 224三、强洗脱溶剂组分B浓度变化范围（Δφ）的影响 225四、柱温变化对保留值的影响 227五、梯度洗脱程序曲线形状的影响 228六、流动相流速（F）对梯度洗脱的影响 229七、色谱柱死体积（Vm）对梯度洗脱时间（tG）的影响 231八、色谱系统的滞留体积（VD）对梯度洗脱时间（tG）的影响 231第三节  优化梯度洗脱的方法 232一、建立梯度洗脱方法的一般步骤 232二、梯度洗脱中的实验条件 234第四节  梯度洗脱的图示方法 237一、二元溶剂梯度洗脱 237二、三元溶剂梯度洗脱 238三、四元溶剂梯度洗脱 240四、用极坐标和球面坐标描述梯度洗脱 241参考文献 243第八章  高效液相色谱法的基本理论节