玛丽出生六天后即位为苏格兰女王。为了躲避与爱德华六世的婚姻，在5岁时被送往法兰西，由她的母亲玛丽•德•吉斯代为摄政。她在法兰西生活、长大、接受教育，生活奢华稳定。1558年，与法兰西的弗朗索瓦二世结婚。同年她信仰天主教的表亲英格兰的玛丽一世去世，随即根据英格兰法律玛丽一世的妹妹——伊丽莎白一世女王即位，但是伊丽莎白一世信仰新教，在当时以天主教为W一宗教的情况下，被视为异端；作为将新教定为国教的英格兰来说，伊丽莎白一世则是W一正统王位的继承人。借由欧洲各国对于异教的恐惧以及罗马天主教对于异教徒的排斥，玛丽•斯图亚特对外宣布自己拥有英格兰王位合法继承权。 并且拒绝核准《爱丁堡条约》，拒绝承认伊丽莎白一世为英格兰女王，并将英格兰王室纹章用于自己的部队。1560年，弗朗索瓦二世去世，在法兰西宫廷中受到婆婆凯瑟琳的冷眼，迫于苏格兰国内局势动荡，次年返回苏格兰亲政。后来她被伊丽莎白一世囚禁于英格兰，并最终以叛国罪处决。