《生物化学与分子生物学实验指导(第3版)》是高等医药院校实验课程教材。教材共分三篇,内容包括:生物化学与分子生物学实验基本技术;生物化学与分子生物学教学实验;生物化学与分子生物学常用资料及数据。 第一篇 生物化学与分子生物学实验基本技术第一章 生物化学实验基本操作第一节 实验室规则第二节 基本实验操作一、玻璃仪器的清洗二、玻璃仪器的干燥三、特殊污物的清洗四、塑料器皿的清洗五、刻度吸管的使用六、可调式微量移液器的使用七、溶液的混匀、加热、保温及冷却第三节 常用实验仪器的使用一、LD5-2A离心机的使用方法二、Neofuge 13R台式高速冷冻离心机使用方法三、紫外/可见分光光度计的使用方法第四节 常用实验标本的制备一、血液样本的收集二、尿液样本的收集与保存三、组织样品的制备第五节 实验报告的书写一、实验报告基本格式二、书写实验报告应注意事项第二章 分光光度技术第一节 基本原理一、光的一般知识二、发射光谱与吸收光谱三、朗伯-比尔定律第二节 分光光度计的结构—、光源二、分光系统三、狭缝四、吸收池五、检测系统第三节 分光光度技术的应用一、用于溶液中物质的定量测定二、用于溶液中物质的定性测定第三章 电泳技术第一节 基本原理一、电泳的概念二、电泳的主要影响因素第二节 电泳的分类一、按分离目的分类二、按分离原理分类三、按支持介质分类四、其他分类第三节 常用电泳技术一、纸电泳二、乙酸纤维素薄膜电泳三、琼脂糖凝胶电泳四、聚丙烯酰胺凝胶电泳五、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳六、等电聚焦电泳七、双向电泳八、毛细管电泳九、单细胞凝胶电泳十、脉冲场凝胶电泳十一、特殊电泳第四章 层析技术第一节 基本知识一、层析的基本概念二、层析技术的分类三、层析的基本原理第二节 离子交换层析一、基本原理二、离子交换介质三、分离过程四、离子交换层析的应用第三节 凝胶层析一、基本原理二、常用凝胶三、凝胶层析的应用第四节 亲和层析一、基本原理二、基质与配体的选择第五节 高效液相色谱一、基本概念二、基本装置第五章 离心技术第一节 基本原理一、离心机的力学原理二、离心机的工作原理第二节 离心机的类型一、按速度分类二、按用途分类第三节 离心机使用及注意事项一、离心机的使用二、离心机使用及维护三、离心过程留意观察四、离心完毕后精心处理五、使用完毕认真登记六、离心机常见故障及排除方法第六章 透析技术第一节 透析原理及影响因素第二节 透析技术的应用第三节 透析操作及注意事项第七章 生物大分子制备第一节 细胞破碎及细胞器分离一、细胞破碎二、细胞器分离第二节 生物大分子的分离与纯化一、蛋白质(酶)的分离与纯化二、核酸的分离与纯化第三节 提纯后的处理一、样品的浓缩二、样品的干燥及贮存第八章 分子生物学基本技术原理第一节 核酸分子杂交一、核酸分子杂交的基本理论二、核酸分子探针三、核酸分子杂交的种类与方法第二节 DNA克隆技术基本原理一、获取目的基因二、构建基因载体三、限制性内切核酸酶的作用四、DNA分子重组五、重组DNA分子导入宿主细胞六、阳性重组体的筛选和鉴定七、克隆基因的表达第三节 聚合酶链反应一、基本原理与方法二、PCR技术的应用第四节 实时定量PCR一、Ct值定量原理二、实时定量PCR荧光标记方法三、实时定量PCR技术的应用第五节 反转录PCR一、模板RNA二、反转录引物三、反转录酶四、离子强度五、脱氧核苷三磷酸底物第六节 western印迹一、蛋白质凝胶电泳二、转膜三、封闭四、免疫杂交与显色第二篇 生物化学与分子生物学教学实验第九章 基本理论实验实验一 蛋白质的沉淀、变性及等电点的测定一、蛋白质的沉淀与变性二、蛋白质等电点的测定实验二 理化因素对唾液淀粉酶活性的影响实验三 琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用实验四 脂肪酸的β-氧化作用——酮体的生成和利用实验五 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定(赖氏法)第十章 基本技术实验实验六 蛋白质的透析实验七 蛋白质的定量测定(一):酚试剂法(改良Lowry法)实验八 蛋白质的定量测定(二):紫外分光光度法实验九 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验十 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳实验十一 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量实验十二 肌肉组织氨基移换作用(纸层析法)实验十三 胡萝卜素的柱层析分离实验十四 碱性磷酸酶米氏常数的测定第十一章 综合强化实验实验十五 激素对血糖浓度的影响一、血糖的定量测定——葡萄糖氧化酶法二、胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响实验十六 血清γ-球蛋白的分离、纯化及鉴定实验十七 核酸的制备及测定第十二章 分子克隆技术基础实验实验十八 质粒DNA的提取(碱裂解法)实验十九 限制性核酸内切酶对质粒DNA的酶切作用实验二十 DNA的琼脂糖凝胶电泳实验二十一 感受态细菌的制备及质粒DNA的转化实验二十二 核酸的分子杂交实验二十三 聚合酶链反应体外扩增DNA(PCR)实验二十四 反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)实验二十五 实时定量PCR(Real-time PCR)实验二十六 蛋白质印迹(Western blotting)第十三章 学生设计性实验第一节 设计性实验概述一、设计性实验的概念二、学生设计性实验的基本程序第二节 设计性实验的选题和设计一、设计性实验的选题二、实验设计与实施第三节 数据的记录与处理一、实验研究的观察记录二、实验数据的处理第四节 实验报告和论文的撰写一、实验报告的撰写二、科研论文撰写第五节 设计性实验教学组织案例第三篇 生物化学与分子生物学常用资料及数据第十四章 化学试剂分级及注意事项第一节 一般化学试剂的分级一、化学试剂的分级二、易变质及需要特殊方法保存的试剂第二节 试剂配制的一般注意事项第十五章 常用试剂配制第一节 生物化学与分子生物学实验中常用试剂的配制一、有机试剂的配制二、细菌培养基和抗生素的配制三、生化实验中常用缓冲液配制四、常用电泳缓冲液五、常用凝胶上样缓冲液的配制六、常用贮存液的配制七、细菌的保存第二节 重铬酸洗液的配制与再生附录 常用的生物化学与分子生物学相关网站一、国内网站二、国外网站
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